冻存管作为生物样本低温储存的核心载体，其规范使用直接关系到样本活性、实验安全性及数据可靠性。在科研实验和临床样本管理中，不少使用者因操作习惯或认知偏差，陷入使用误区，进而导致样本污染、泄漏、活性丧失等问题。
误区一：忽视冻存管材质适配性，盲目选用。部分使用者为节省成本，随意选用普通塑料，未根据储存温度（如-80℃超低温、液氮气相/液相）选择适配材质。普通塑料在超低温下易脆裂，液氮液相环境中还可能因材质渗透性导致样本污染。解决方案：优先选用聚丙烯（PP）材质，其耐低温性强、化学稳定性好，适配-80℃至液氮环境；液氮液相储存需选择标注“液氮兼容”的专用冻存管，避免使用聚苯乙烯（PS）等不耐低温材质。同时，根据样本类型（细胞、血清、核酸等）选择带内旋盖、无菌无酶的型号，减少样本交叉污染风险。
误区二：样本装载量不当，影响冻存效果。常见两种：一是装载过满，冻存时样本膨胀导致管盖顶开、泄漏；二是装载过少，管内空隙过大，样本与空气接触面积增加，易发生氧化损伤，且复苏时易出现温度不均。解决方案：严格控制装载量，一般为容积的70%-80%。该比例既能容纳样本冻存时的体积膨胀（约10%），又能减少管内空气残留，兼顾安全性和样本活性。对于珍贵样本，可搭配冻存管内托使用，避免样本在储存过程中晃动造成损伤。
误区三：密封操作不规范，导致样本污染或泄漏。未拧紧管盖、未使用密封垫，或拧紧时用力过猛损坏螺纹，均会导致低温环境下管内样本泄漏、外界污染物侵入，尤其在液氮储存中，液氮渗入管内解冻时易引发爆炸风险。解决方案：密封前检查管盖螺纹和密封垫是否完好，无破损、变形情况；采用“手拧到位+轻微加固”的方式密封，避免用力过度损坏螺纹；对于高价值或易挥发样本，可在管盖外侧缠绕parafilm膜进一步密封，双重保障密封性。
误区四：冻融过程急速升温/降温，破坏样本活性。冻存时直接将样本放入-80℃冰箱或液氮，复苏时室温放置或高温水浴，温度骤变会导致样本内形成冰晶，破坏细胞结构、核酸完整性。这是导致样本活性下降、实验数据偏差的主要原因之一。解决方案：遵循“梯度冻存、快速复苏”原则。冻存时，先将样本放入4℃冰箱预冷30分钟，再转入-20℃冰箱2小时，最后放入-80℃冰箱过夜或转入液氮长期储存；复苏时，将冻存管快速放入37℃恒温水浴锅，不断摇晃至样本全融化（一般1-2分钟），避免样本长时间处于低温或高温环境。
误区五：储存与取用混乱，造成样本混淆或损坏。未做清晰标识、随意堆叠冻存管，取用时分不清样本信息；或从液氮中取出后直接开盖，温差过大导致管内压力骤变，样本喷溅。解决方案：冻存管外贴耐低温标签，标注样本名称、浓度、冻存日期等关键信息，必要时进行双重标识（管身+管盖）；储存时采用冻存盒分类摆放，避免挤压碰撞；取用液氮中储存的冻存管时，佩戴防护手套和护目镜，先将它取出置于过渡容器中，待温度回升至-20℃左右再开盖，防止压力骤变引发危险。
冻存管的规范使用是生物样本储存的基础，每一个操作细节都关乎样本质量和实验安全。规避上述五大误区，严格遵循标准化操作流程，才能最大限度保留样本活性，保障实验结果的准确性和可靠性。科研工作者和样本管理人员需提高重视，将规范操作融入每一个环节，为实验研究和临床应用筑牢样本安全防线。
