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如何选择合适的PCR板来确定实验数据?

更新时间:2022-07-13      点击次数:886
  PCR是一种敏感和有效的方法,用于在短时间内将单拷贝的目标DNA序列扩增至数百万拷贝。因此用于PCR反应的PCR板必须避免存在污染物和抑制剂,同时又具有可保障PCR效果的高质量。
  
  那么如何选择合适的耗材以获得准确可靠的实验数据呢?
  
  PCR板通常由聚丙烯制成,因为它是惰性的并且能够承受热循环过程中温度的快速变化。聚丙烯的惰性性质使其对于反应物质的吸收降低至小,确保获取PCR结果。
  
  为了进一步保障在纯度和生物兼容性方面的批次间一致性,应当在生产过程中使用全新未循环使用的医学级或分子生物学级高品质聚丙烯原料。请注意,某些PCR边框用更强的聚碳酸酯框制成,以与高通量机器人应用兼容。
  
  PCR管和板通常可提供多种不同的颜色形式,以便于对于样品的视觉区分和鉴别,特别是在高通量实验中。尽管耗材的颜色对DNA扩增没有影响,但在设置实时PCR板的反应时,与透明耗材相比,我们更推荐使用白色耗材,以实现灵敏和准确的荧光检测。
  
  白色耗材通过阻止荧光折射出管来提高qPCR数据的灵敏度和一致性。折射被小化时,更多的信号被反射回检测器,从而增加信噪比。
  
  此外,白色管壁可阻止荧光信号传递至PCR仪模块,避免被吸收或不一致地反射荧光信号,从而使重复实验中的差异降低。在少数情况下,如果荧光探测器由于白色孔的信号反射增强而过饱和,可以使用磨砂孔替代。